La Citometría de Flujo en el Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable (1953-2023)

Abstract

La Citometría en el Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable (1953-2023)

La citometría se incia en el IIBCE a comienzos de la década del 50' con la incorporación por parte del Prof. Francisco A. Sáez del primer citofotómetro en el IIBCE luego de desarrollar pasantías con A. Pollister (EEUU) y T. Caspersson (Suecia). Los primeros trabajos y publicaciones incluyeron la determinación del contenido de ADN en diferentes especies. Más adelante, Máximo E. Drets, colaborador del Prof. Sáez, desarrolló mejoras en el instrumento que permitieron realizar más medidas por núcleo celular. Luego del descubrimiento realizado por M. Drets y M. Shaw de las bandas G- en los cromosomas humanos, se modificó el citofotómetro para construir mapas precisos de la posición longitudinal de dichas bandas. La incorporación sucesiva de nuevos equipos citofotométricos y el desarrollo de programas informáticos específicos hicieron posible la implementación de la exploración computarizada de núcleos y cromosomas y su representación gráfica con elevada resolución. De esta prolífica etapa cabe destacar la descripción original de la presencia de intercambios de cromátidas hermanas (SCE) a nivel telomérico consagrado en la literatura como tSCE. Un nuevo hito en la historia de la citometría en el IIBCE fue la puesta en marcha en 1998 del Servicio de Citometría de Flujo y Clasificación Celular (SECIF) con un equipo FACSvantage (Becton Dickinson) el cual permitió la cuantificación y clasificación de poblaciones celulares y partículas subcelulares a razón de miles de eventos por segundo en forma multiparamétrica. Además, SECIF contaba con un analizador FACSCount para la determinación por conteo absoluto de poblaciones linfocitarias CD3, CD4 y CD8 para el diagnóstico y seguimiento de pacientes portadores de VIH. Durante 20 años, SECIF desarrolló análisis citométricos y clasificaciones con alto grado de pureza en diferentes áreas de investigación incluyendo inmunología, ciclo celular, contenido de ADN en células animales y vegetales, diferenciación y muerte celular, biología de la reproducción y microbiología, entre otras. En 2018 se incorpora al Servicio un equipo Astrios EQ (Beckman Coulter) que no sólo posee la capacidad de analizar y clasificar a una velocidad superior a 70.000 eventos por segundo sino que también permite detectar partículas de hasta 200 nm lo que amplía en forma considerable el rango de aplicaciones citométricas.